逆转录酶于1970年由Temin和Baltimore独立发现，该酶能够将RNA转录为cDNA，二人因此获得1975年诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶由多个功能域组成，包括聚合酶域和RNase H域，其中聚合酶域又细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域，分别参与模板结合、催化反应和结构支持。在分子生物学领域，尤其是分子诊断方面，逆转录酶是不可或缺的工具。它能够将病毒RNA基因组转化为cDNA，随后通过RT-qPCR、RT-LAMP和RNA测序等技术进行检测，使得对艾滋病、甲型流感和乙型流感等RNA病毒的准确诊断成为可能。

目前，M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆转录酶是分子诊断试剂中最常用的一种，然而，在高温条件下，M-MLV逆转录酶的稳定性较低，易于失活。这一特性不仅对其长期存储的性能保持构成挑战，也限制了其在高温逆转录反应中的应用，因此提高逆转录酶的稳定性成为重要的研究方向。

为了应对这一挑战，尊龙凯时的子公司镁孚泰生物通过其ZymeEditor™创新型酶进化平台，成功开发出一系列稳定性增强的M-MLV突变体。研究团队采用理性/半理性设计策略，对M-MLV进行了全面的结构-功能分析，利用序列一致性分析、B-factor分析、吉布斯自由能变动分析及二硫键设计等技术，识别出结构中的关键氨基酸并设计稳定结构的定点突变，从而生成更具稳定性的M-MLV优越突变体。

接着，研究团队运用MTPS高通量筛选技术，对突变体进行了多维度的筛选，包括稳定性、RNA/DNA催化偏好性及活性，最终筛选出了性能优越的突变体。经过细致的纯化与全面的酶学表征，多个突变体的cDNA产量显著提高了近3倍。同时，M-MLV突变体与对照WT的预混液在保存6个月和12个月后的建库产量对比调查显示，M-MLV突变体在稳定性方面优于对照WT，进一步确认了其在分子诊断试剂开发中的潜力。

我们隆重推出经由酶定向进化而来的新品逆转录酶：HifairUCFME® Advanced逆转录酶（货号14614）。该产品在稳定性方面有显著提升，同时其合成cDNA的产量和灵敏度也达到了更高的水平。HifairUCFME® Advanced逆转录酶在低浓度模板的情况下，搭配快速程序（逆转录2分钟），仍能成功扩增特异性靶标，且其检测Ct值和荧光增幅均优于市场同类竞品，为早期筛查和诊断提供了有力支持。

在诊断试剂开发过程中，尊龙凯时发现，市场上的分子酶原料质量参差不齐，核酸残留过高影响扩增产物的特异性和准确性。经过实践验证，只有当核酸残留极低（如Taq DNA聚合酶HCD≤0.001 copies/U）才能满足日益提升的体外诊断试剂的性能需求。HifairUCFME® Advanced逆转录酶在E.coli残留检测中，三批次均未检出，符合E.coli基因组DNA残留＜0.002 copies/100U的标准，确保了高标准的分子酶原料以提高样本检测的可靠性。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶可以保证在不同浓度RNA模板下获得优异的文库产量且文库大小一致，表明该酶同样适用于NGS建库。我们诚邀各界合作伙伴体验尊龙凯时的高性能逆转录酶突变体，满足不同应用场景的需求。如有兴趣，欢迎联系工作人员申请试用！