尊龙凯时培养基在微生物检测和增菌培养方面展现了独特的优势,特别是在大肠埃希氏O157菌的选择性增菌中,符合FDA标准的要求。
一、用途及原理
该培养基专门用于大肠埃希氏O157菌的选择性增菌,能够有效地促进该菌的生长。它含有蛋白胨、酪蛋白水解物和酵母浸粉,这些成分为细菌提供了所需的基本营养。同时,磷酸氢二钠和磷酸二氢钾有助于维持培养基pH的稳定。乳糖和丙酮酸钠作为碳源,能进一步促进大肠埃希氏O157菌的繁殖。此外,吖啶黄素、万古霉素及头孢磺啶能够抑制大部分革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌,保证了选择性的有效性。
二、培养基配方(g/L)
本培养基的配方如下:
- 蛋白胨:100g
- 氯化钠:50g
- 磷酸氢二钠:36g
- 磷酸二氢钾:15g
- 酪蛋白水解物:50g
- 乳糖:100g
- 丙酮酸钠:10g
- 酵母浸粉:60g
- 吖啶黄素:0.01g
- 万古霉素:0.008g
- 头孢磺啶:0.01g
培养基的pH值调至7.2±0.2。
三、配制方法
首先,称取该配方的成分421g,并加热溶解于1000ml的蒸馏水中,然后分装至225mL的瓶中。之后,进行121℃高压灭菌15分钟,冷却以备使用。
接下来,将25g样品加入225mL的培养基中充分混匀,放置在37±1℃的环境中培养5小时。随后,向培养基中加入1支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素225mg和万古霉素18mg)及1支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶225mg),转至42±1℃继续培养18-24小时。
四、生长现象及结果观察
在36±1℃下接种质控菌株进行18-24小时的培养,观察到以下生长现象:
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量 (CFU) | 生长现象 |
---|---|---|---|
大肠埃希氏菌 | ATCC25922 | 10-100 | 浑浊 |
鼠伤寒沙门氏菌 | ATCC14028 | 10-100 | 浑浊 |
大肠埃希氏O157菌 | ATCC35150 | 10-100 | 浑浊 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC25923 | 1000-5000 | 不生长 |
铜绿假单胞菌 | ATCC27853 | 1000-5000 | 不生长 |
通过以上观察,能够清晰地识别出大肠埃希氏O157菌的生长情况,有效保障了本实验的准确性和可靠性。
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